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南京信帆生物:凝集吸收實驗原理、材料和方法
更新時間:2016-04-22   點擊次數(shù):1534次

一、原理

腸道桿菌中的許多細(xì)菌都有部分相同的抗原結(jié)構(gòu)。因之一種細(xì)菌可與另一種細(xì)菌相應(yīng)的抗血清發(fā)生交叉凝集反應(yīng)。用一種過量的細(xì)菌抗原與發(fā)生交叉凝集反應(yīng)的抗血清相結(jié)合。可將其共同抗體吸去,剩下抗體只能與特異性抗原起反應(yīng),這種實驗即稱凝集吸收實驗。

利用凝集吸收實驗可制備單價因子血清,以進(jìn)行細(xì)菌抗原結(jié)構(gòu)的分析及鑒定菌型。

二、材料

1、免疫血清:1:10稀釋傷寒桿菌免疫血清。

2、菌液:腸炎桿菌菌液,傷寒桿菌菌液。

3、試管、吸管、毛細(xì)吸管。

三、方法

1、1/10稀釋傷寒桿菌免疫血清分別與腸炎桿菌與傷寒桿菌進(jìn)行玻片凝集,可見傷寒免疫血清與兩種菌均有凝集,說明二菌具有共同抗原結(jié)構(gòu),故發(fā)生交叉凝集反應(yīng)。

2、將一定量的腸炎桿菌菌液加入1:10稀釋傷寒桿菌免疫血清中,放37℃水浴箱中作用2小時,取出后離心沉淀,吸取上清夜,棄去沉淀。

3、將吸收過的上清夜與稀釋腸炎桿菌菌液做玻片凝集,觀察結(jié)果。如仍有凝集時則將此上清夜再加濃腸炎桿菌菌液進(jìn)行吸收,方法如上。

4、重復(fù)吸收過的上清夜分別與稀釋腸炎桿菌及傷寒桿菌菌液進(jìn)行玻片凝集。如與前者無凝集而與后者有凝集,則表示傷寒桿菌免疫血清中的抗腸炎抗體已被*吸收。

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